Citometria

A citometria de fluxo é uma metodologia capaz de analisar simultaneamente diversos parâmetros para avaliação de células ou partículas em suspenção. \nSeu princípio está na incidência de uma fonte de luz laser que intercepta cada partícula. As amostras podem ser verificadas por tamanho e dispersão, e através de marcação com fluorocromos ou anticorpos monoclonais acoplados a fluorocromos, que permitem a identificação e quantificação pelo tamanho, granulosidade e intensidade de fluorescência de cada partícula. Os fluorocromos são excitados pela radiação laser e emitem um comprimento de onda que é detectado por um sensor, o fotomultiplicador (PMT). Estes convertem a luz em sinais eletrônicos que são enviados ao computador possibilitando, através de software específico, uma análise multiparamétrica para obtenção dos resultados. Esta análise é realizada através de representações gráficas da intensidade de fluorescência emitida pelo fluorocromo e as respectivas características morfológicas das células/partículas.\nA combinação de diferentes marcadores possibilita esta análise multiparamétrica rica que vem sendo aplicada nas mais diversas áreas de conhecimento. Alguns modelos de citômetros têm capacidade de separar fisicamente células individuais ou por tipo (“cell sorters”) permitindo clonagem de células, e preparação de sub-tipos de células para estudos posteriores ou mesmo para aplicações médicas.

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