Citometria

Instruções gerais

Leitura de amostras provenientes de suspensão celular de origem murina ou humana. Se as amostras forem provenientes de ensaios in vitro com patógenos nível NB1 ou NB2, favor especificar para verificação da possibilidade de leitura.  Se as amostras forem provenientes de doadores humanos, incluindo pacientes, é desejável a fixação com paraformaldeído 2 a 4%. Outros casos, favor entrar em contato com (21) 25621611 ou (21) 987811222/mariana.gandini@fiocruz.br.

O FACS AriaIIu possui três lasers: azul(B-488nm), vermelho (R-635nm) e violeta (V-405nm) com os seguintes filtros: B-530/30; B-576/26; B-610/20; B-675/20 ou B-695/40; B-780/60; R-660/20; R-710/50; R-780/60; V-450/40; V-530/30; V-660/40.

Instruções gerais

Separação de amostras provenientes de suspensão celular de origem murina ou humana. Se as amostras forem provenientes de ensaios in vitro com patógenos nível NB1 ou NB2, favor especificar para verificação da possibilidade de leitura.  Se as amostras forem provenientes de doadores humanos, incluindo pacientes, é desejável a fixação com paraformaldeído 2 a 4%. Outros casos, favor entrar em contato com (21) 25621611.

Possuimos as opções de nozzle: 100nm (pressão de 20psi), 85um (pressão de 45psi) e 70nm (pressão de 70psi). A separação pode ser feita em até 4 populações (tubos de 15mL, tubos de 5mL e eppendorfs de 2mL). Também possuimos o módulo de separação em placas de 96 poços. É possível a separação celular semi-estéril (o equipamento não está dentro de uma CSB) e com controle de temperatura (4ºC).  

O FACS AriaIIu possui três lasers: azul(B-488nm), vermelho (R-635nm) e violeta (V-405nm) com os seguintes filtros: B-530/30; B-576/26; B-610/20; B-675/20 ou B-695/40; B-780/60; R-660/20; R-710/50; R-780/60; V-450/40; V-530/30; V-660/40.

Instruções Gerais

Antes de realizar marcação, favor contactar a plataforma no 21-2562-1611 ou via citosortrj.plat@fiocruz.br

Atenciosamente

Treinamento prático, sob demanda, para capacitar o cliente a usar o LSRFortessa sem o acompanhamento técnico

Realiza análise multiparamétrica até 11 fluorocromos com acompanhamento técnico

Realiza análise multiparamétrica até 11 fluorocromos com acompanhamento técnico

Realiza análise multiparamétrica até 11 fluorocromos sem acompanhamento técnico

Realiza análise multiparamétrica até 11 fluorocromos sem acompanhamento técnico

Treinamento prático, sob demanda, para capacitar o cliente a usar o S6 sem o acompanhamento técnico

 Separação de células em até 6 vias.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Treinamento prático, sob demanda, para capacitar o cliente a usar o LSRFortessa sem o acompanhamento técnico.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Treinamento prático, sob demanda, para capacitar o cliente a usar o FACSCALIBUR sem o acompanhamento técnico.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Aquisição no FACSCalibur™ com acompanhamento técnico. Trata-se de um citômetro de fluxo analógico com dois lasers (azul-488 nm, vermelho-633 nm), apresentando capacidade para análise de até 6 parâmetros, incluindo tamanho e granulosidade.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Aquisição no FACSCalibur™ pelo cliente, sem acompanhamento técnico. Trata-se de um citômetro de fluxo analógico com dois lasers (azul-488 nm, vermelho-633 nm), apresentando capacidade para análise de até 6 parâmetros, incluindo tamanho e granulosidade.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Aquisição no FACSVerse com acompanhamento técnico. Reservado para a análise de fatores solúveis como citocinas e quimiocinas empregando microesferas fluorescentes pelo ensaio Cytometric Bead Assay (CBA). Também é possível realizar análise customizada de mediadores solúveis empregando microesferas funcionais e fluorescentes pela tecnologia de protein/peptide/antigen arrays.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Software reservado para a análise de fatores solúveis como citocinas e quimiocinas empregando microesferas fluorescentes pelo ensaio Cytometric Bead Assay (CBA).

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Execução do ensaio completo CBA, incluindo o preparo de amostras, aquisição e análise dos dados.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Aquisição no ImageStream MK II (Amnis-Merck) com acompanhamento técnico, reservado para a análise de múltiplas imagens de alta resolução. Permite a realização de até 100 mil fotos de alta definição por arquivo, como sinalização celular, co-localização, interação entre células, internalização, dano do DNA e reparo, ciclo celular e mitose, autofagia, alvos imunoterápicos e diferenciação celular.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Análise de múltiplas imagens de alta resolução geradas no ImageStream MK II.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Treinamento prático, sob demanda, para capacitar o cliente a usar o Cytoflex S sem o acompanhamento técnico.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Aquisição no CytoFlex S com acompanhamento técnico. Realiza a análise multiparamétrica de alta complexidade ou a análise de partículas em escala nanométrica que compreendem anteparos de 100-1000 nm.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Execução do ensaio completo de micropartículas, incluindo o preparo de amostras, aquisição e análise dos dados.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Aquisição no Bioplex 200 com acompanhamento técnico. Reservado para a aquisição de fatores solúveis como citocinas e quimiocinas empregando microesferas magnéticas e fluorescentes, pelo ensaio Luminex.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Software reservado para a análise de fatores solúveis como citocinas e quimiocinas que foram geradas pelo ensaio Luminex.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Execução do ensaio completo Luminex, incluindo o preparo de amostras, aquisição e análise dos dados

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Treinamento prático, sob demanda, para capacitar o cliente a usar o Countess II FL sem o acompanhamento técnico.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Possui a capacidade de contar células, medir a viabilidade celular, determinar o valor médio do tamanho celular e monitorar a expressão de proteínas fluorescentes em apenas 10 segundos.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Aquisição no CytoFLEX S pelo cliente, sem acompanhamento técnico. Realiza a análise multiparamétrica de alta complexidade ou a análise de partículas em escala nanométrica que compreendem anteparos de 100-1000 nm.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Software reservado para a análise de dados multiparamétricos, partículas em escala nanométrica e/ou fatores solúveis obtidos por clientes internos da Plataforma de Citometria de Fluxo do Instituto René Rachou (IRR).

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Realiza separação de células (sorting) com o acompanhamento técnico.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Aconselhamento e consultoria científica em citometria de fluxo.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Aquisição no LSRFortessa™ com acompanhamento técnico. Trata-se de um citômetro de fluxo digital com três lasers (violeta - 405 nm, azul - 488 nm, vermelho - 633 nm). Apresenta capacidade para análise de até 13 parâmetros, incluindo tamanho e granulosidade. É possível realizar análise multiparamétrica de alta complexidade, investigação de viabilidade e proliferação, análise fenotípica após ensaio de fagocitose e dosagem de fatores solúveis.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Aquisição no LSRFortessa™ pelo cliente, sem acompanhamento técnico. Trata-se de um citômetro de fluxo digital com três lasers (violeta - 405 nm, azul - 488 nm, vermelho - 633 nm). Apresenta capacidade para análise de até 13 parâmetros, incluindo tamanho e granulosidade. É possível realizar análise multiparamétrica de alta complexidade, investigação de viabilidade e proliferação, análise fenotípica após ensaio de fagocitose e dosagem de fatores solúveis.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Treinamento prático, sob demanda, para capacitar o cliente a usar o FACSCALIBUR sem o acompanhamento técnico.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Aquisição no FACSCalibur™ com acompanhamento técnico. Trata-se de um citômetro de fluxo analógico com dois lasers (azul-488 nm, vermelho-633 nm), apresentando capacidade para análise de até 6 parâmetros, incluindo tamanho e granulosidade.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Aquisição no FACSCalibur™ pelo cliente, sem acompanhamento técnico. Trata-se de um citômetro de fluxo analógico com dois lasers (azul-488 nm, vermelho-633 nm), apresentando capacidade para análise de até 6 parâmetros, incluindo tamanho e granulosidade.

Antes de iniciar seu protocolo, gentileza entrar em contato na Plataforma pelo telefone 3349-7852.

Equipe de apoio técnico disponível de segunda-feira a sexta-feira, das 9h às 12h e das 14h às 17h.

Equipamento FACs Ária III da marca BD.

Equipamento BD FACs ÁRIA III.

FACs ÁRIA III marca BD.

BD FACS CALIBUR.

BD FACs Calibur.

Equipamento FACsAria III da empresa BD. Usuários devem ser treinados.

O treinamento visa capacitar os usuários para operarem o citômetro de fluxo de forma independente de acordo com as normas institucionais. Serviço oferecido somente para colaboradores internos do ICC.

O treinamento deve ser planejado com o operador antes do agendamento. Serviço disponível das 9h às 17h.

A consultoria verifica a compatibilidade do ensaio e dos fluoróforos com os equipamentos disponíveis. Não aborda questões científicas dos experimentos. Geralmente utilizada em associação com o serviço de aquisição de dados.

Entre em contato com a equipe da plataforma antes do agendamento (rodrigo.netto@fiocruz.br; priscila.hiraiwa@fiocruz.br). Serviço disponível das 9h às 17h.

A plataforma opera o citômetro para adquirir os dados e realizar a separação celular, entrega as amostras e os dados brutos (arquivo FCS) e/ou gráficos obtidos durante a aquisição (PDF da planilha do software do citômetro). O cliente prepara as amostras, define a estratégia de separação celular e analisa os dados. 

O serviço deve ser planejado com o operador antes do agendamento.Serviço disponível das 9h às 17h.

O treinamento visa capacitar os usuários para operarem o citômetro de fluxo de forma independente de acordo com as normas institucionais. Serviço oferecido somente para colaboradores internos do ICC.

O treinamento deve ser planejado com o operador antes do agendamento. Serviço disponível das 9h às 17h.

A consultoria verifica a compatibilidade do ensaio e dos fluoróforos com os equipamentos disponíveis. Não aborda questões científicas dos experimentos. Geralmente utilizada em associação com o serviço de aquisição de dados.

Entre em contato com a equipe da plataforma antes do agendamento (rodrigo.netto@fiocruz.br; priscila.hiraiwa@fiocruz.br). Serviço disponível das 9h às 17h.

A plataforma opera o citômetro para adquirir os dados e entrega os dados brutos (arquivo FCS) e/ou gráficos obtidos durante a aquisição (PDF da planilha do software do citômetro). O cliente prepara as amostras e analisa os dados de forma independente.

O serviço deve ser planejado com o operador antes do agendamento. Serviço disponível das 9h às 17h.

Cliente adquiri e analisa os dados de forma independente. Serviço disponível somente para clientes internos do ICC e que realizaram o treinamento.

Cliente opera o citômetro, prepara as amostras, adquiri e analisa os dados, define a estratégia de separação celular, realiza a separação celular e analisa os dados de forma independente. Serviço disponível somente para clientes internos do ICC e que realizaram o treinamento.

Treinar colaboradores internos do Instituto em como operar o equipamento.

Prestação de serviço de aquisição de dados por profissional capacitado.

Aquisição de dados pelo requisitante previamente treinado

Consultoria para planejamento Experimental.

FACSCelesta™ (Becton Dickinson) é um citômetro de fluxo digital com três lasers (violeta - 405 nm, azul - 488 nm, vermelho - 633 nm). Apresenta capacidade para análise de até 14 parâmetros, incluindo tamanho e granulosidade. 

Laser azul (530/30; 575/25, 610/20, 695/40),

Laser violeta (450/40, 525/50, 610/20, 670/30, 780/60),

Laser vermelho (670/30, 730/45, 780/60).

- Não possui laser UV.

* Proibido o uso de bactérias que podem aderir ao sistema de fluxo.

FACSCelesta™ (Becton Dickinson) é um citômetro de fluxo digital com três lasers (violeta - 405 nm, azul - 488 nm, vermelho - 633 nm). Apresenta capacidade para análise de até 14 parâmetros, incluindo tamanho e granulosidade. 

Laser azul (530/30; 575/25, 610/20, 695/40),

Laser violeta (450/40, 525/50, 610/20, 670/30, 780/60),

Laser vermelho (670/30, 730/45, 780/60).

- Não possui laser UV.

* Proibido o uso de bactérias que podem aderir ao sistema de fluxo.

O BD FacsCan é um citometro de fluxo que possui 2 lasers (azul e vermelho), com capacidade de analise simultânea de até 7 parâmetros (SSC e FSC; 5 cores/fluoróforos). Possui upgrade pela Cytek. 

Com essa configuração é possível seu uso em várias aplicações. 

Canais: 

laser azul (530/30; 585/40)

laser vermelho (670LP; 675/25)

Atenção:

- Proibido a aquisição de bactérias pois podem aderir ao sistema de fluxo.

O BD FacsCan é um citometro de fluxo que possui 2 lasers (azul e vermelho), com capacidade de analise simultânea de até 7 parâmetros (SSC e FSC; 5 cores/fluoróforos). Possui upgrade pela Cytek. 

Com essa configuração é possível seu uso em várias aplicações. 

Canais: 

laser azul (530/30; 585/40; 670LP)

laser vermelho (670LP; 675/25)

Atenção:

- Proibido a aquisição de bactérias pois podem aderir ao sistema de fluxo.

- Necessário a apresentação de certificado de capacitação.

O BD ACCURI C6 é um citometro de fluxo que possui 2 lasers (azul e vermelho), com capacidade de analise simultânea de até 6 parâmetros (SSC e FSC; 4 cores/fluoróforos). Com essa configuração é possível seu uso em várias aplicações. Possui sistema robotizado para leitura de placas.

Canais: 

laser azul (533/30; 585/40)

laser vermelho (670 LP, 675/25)

Atenção:

- Proibido o uso de iodeto de propídio

- Proibido aquisição de bactérias pois podem aderir ao sistema de fluxo.

* Necessária a apresentação de certificado de capacitação.

O BD ACCURI C6 é um citometro de fluxo que possui 2 lasers (azul e vermelho), com capacidade de analise simultânea de até 6 parâmetros (SSC e FSC; 4 cores/fluoróforos). Com essa configuração é possível seu uso em várias aplicações. Possui sistema robotizado para leitura de placas.

Canais: 

laser azul (533/30; 585/40)

laser vermelho (670 LP, 675/25)

Atenção:

- Proibido o uso de iodeto de propídio

- Proibido a aquisição de bactérias pois podem aderir ao sistema de fluxo.

O Cytoflex S é um citometro de fluxo digital que possui 4 lasers (violeta - 405 nm, azul - 488 nm, amarelo - 561 nm, vermelho - 633 nm) com capacidade de análise de até 19 parâmetros sendo 17 cores/fluoróforos além do tamanho e granulosidade, sendo esses dois parâmetros morfológicos detectados pela emissão do laser violeta. Neste equipamento também é possível realizar análise multiparamétrica de alta complexidade e análise de partículas em escala nanométrica que compreendem anteparos de 100-1000 nm.

Com essa configuração é possível seu uso em várias aplicações. 

Canais: 

laser azul (488, 525, 690)

laser vermelho (660, 780, 712)

laser amarelo (561, 610, 585, 690, 780)

laser violeta (405, 450, 525, 610, 660, 780)

Atenção:

- Proibido o uso de bactérias pois podem aderir ao sistema de fluxo.

- Proibido o uso de iodeto de propídio.

O Cytoflex S é um citometro de fluxo digital que possui 4 lasers (violeta - 405 nm, azul - 488 nm, amarelo - 561 nm, vermelho - 633 nm) com capacidade de análise de até 19 parâmetros sendo 17 cores/fluoróforos além do tamanho e granulosidade, sendo esses dois parâmetros morfológicos detectados pela emissão do laser violeta. Neste equipamento também é possível realizar análise multiparamétrica de alta complexidade e análise de partículas em escala nanométrica que compreendem anteparos de 100-1000 nm.

Com essa configuração é possível seu uso em várias aplicações. 

Canais: 

laser azul (488, 525, 690)

laser vermelho (660, 780, 712)

laser amarelo (561, 610, 585, 690, 780)

laser violeta (405, 450, 525, 610, 660, 780)

Atenção:

- Proibido o uso de bactérias pois podem aderir ao sistema de fluxo.

- Proibido o uso de iodeto de propídio.

* Cliente necessita apresentar certificado de capacitação para o uso sem o acompanhamento do técnico responsável. 

Treinamento na análise de imagens e contagem de spots (mímino 2h)

Treinamento prático na tecnica de elispot (mínimo 30h) 

* A leitura dos ensaios de elispot são feitas em placas de 96 poços. Cada poço corresponde a uma amosta a ser analisada. Portanto, o usuário deverá solicitar o número de amostras que deseja analisar e não o número de placas. *

 CRITÉRIOS DE ATENDIMENTO

a)  O usuário deverá cadastrar o seu Grupo de Pesquisa através do Sistema da RPT

b)  Após a aprovação do seu Grupo de Pesquisa pela coordenação da RPT, o coordenador do grupo deverá cadastrar os seus colaboradores. Assim, tanto o coordenador do Grupo de Pesquisa quanto os seus colaboradores já podem encaminhar as solicitações para a subunidade em questão. Todas as solicitações dos colaboradores precisam ser aprovadas pelo coordenador do Grupo de Pesquisa e a partir daí são enviadas automaticamente pelo Sistema aos responsáveis pela subunidade.

Condições de aceitação das amostras

a)  As placas devem estar secas, acondicionadas e transportadas ao abrigo da luz e identificadas com o nome do usuário.

b)  O usuário deve trazer mídia digital para gravação dos resultados. 

c)  Caso alguma amostra seja rejeitada um formulário de registro deverá ser preenchido e entregue ao usuário especificando o motivo que determinou a rejeição.

d)  O usuário é responsável pelo retorno da placa de elispot para o laboratório, bem com o armazenamento adequado para, se necessário, novas leituras.

e)  As amostras somente serão aceitas quando acompanhadas do formulário Protocolo de Entrada de Material  preenchido.

Entrega de materiais

a)  Horários para entrega dos materiais: Diariamente das 9:00 as 17:00 hs mediante agendamento através do Sistema da RPT

b)  Os materiais devem ser trazidos pelo usuário dentro do horário previamente agendado pelo Sistema da RPT para análise. A subunidade se localiza no Instituto Oswaldo Cruz – Fiocruz, Pavilhão Leônidas Deane (Pavilhão 26), Laboratório de Imunoparasitologia - Sala 404/408

Entrega dos resultados

a)  Os resultados obtidos serão disponibilizados através do Sistema da RPT, além de serem arquivados em mídia digital portada pelo usuário e entregue a este.

b)  Os arquivos gerados pela leitura serão fornecidos ao usuário em formatos de planilha numérica (MS excell) e imagens das placas, antes e depois da contagem, em formato de imagem (jpeg).

c)   O resultado entregue será caracterizado como bom, regular ou ruim dependendo da qualidade do ensaio e das placas entregues para leitura automática.

A leitura dos ensaios de elispot são feitas em placas de 96 poços. Cada poço corresponde a uma amosta a ser analisada. Portanto, o usuário deverá solicitar o número de amostras que deseja analisar e não o número de placas. 

CRITÉRIOS DE ATENDIMENTO

a)  O usuário deverá cadastrar o seu Grupo de Pesquisa através do Sistema da RPT

b)  Após a aprovação do seu Grupo de Pesquisa pela coordenação da RPT, o coordenador do grupo deverá cadastrar os seus colaboradores. Assim, tanto o coordenador do Grupo de Pesquisa quanto os seus colaboradores já podem encaminhar as solicitações para a subunidade em questão. Todas as solicitações dos colaboradores precisam ser aprovadas pelo coordenador do Grupo de Pesquisa e a partir daí são enviadas automaticamente pelo Sistema aos responsáveis pela subunidade.